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5分钟前 西藏动物实验室来电垂询「在线咨询」[英瀚斯2eefa30]内容：简单介绍Agomir高架十字迷宫行为学检测：

实验原理

高架十字迷宫（the elevated plus maze,EPM）是评价啮齿类动物焦躁反应的实验方法 , 相较伤害性刺激所致小鼠焦躁行为检测（如电刺激 、 噪声刺激 、 饮食剥夺和暴露在捕食者气味等）, 该实验具有操作简单的优点 , 能直观反映小鼠的条件应答 。 EPM实验是在高架Y型迷宫的基础上发展而来的 。 EPM由开臂（open arms和闭臂（closed arms）各两条组成 , 呈十字形交叉 , 交义部分为中央区 , 距地面有一定高度 。其原理是由于面对新事物开臂 小鼠会产生好奇心去探究 , 而它们有嗜暗的天性（闭臂）, 两者之间发生探究与回避的冲突行为，产生焦躁心理。整个迷宫距离地面的高度相当于人类站在悬崖边，易导致动物产生恐惧不安的心理。可以通过对比小鼠在开臂和闭臂内的滞留时间和路程来评价小鼠的焦躁行为。

EPM实验在药品开发和研究中得到广泛的应用：主要用于苯二氮卓类药品的抗焦躁作用研究 及筛选具有抗焦l虑作用的新药,也被用于研究精神性药品滥用的影响及激s素的功能,应激对生殖、衰老、妊s娠的影响等。抗焦l虑药主要选择性地抑制边缘系统 的海马、杏仁核 ,产生抗焦躁作用。

因 SP 是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限，故有学者认为以上的临床与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关，进一步研究发现，在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加，血浆中 CORT 增加，功能抑制等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中 CORT 的水平的增加，这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似，为克服SP 中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点，在 SP 基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。

1.2多平台睡眠剥夺法

M P法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中，在 M P中为扩展大鼠的活动空间将台由 SP 中的 1 个增加至 7 个，仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验，因大鼠可以在 7个台间自由活动，故活动范围较 SP 中有明显增大。经实验比较，在M P中反映应激增强的一些指标，如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在，甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加较SP的更高，提示 M P较SP有更强的应激性!考虑到大鼠为群居动物，单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应，有学者将 M P 法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!

简单介绍Agomiragomir的使用需要注意以下几点：• agomir的设计需要参考miRbase数据库中的微RNA序列，选择合适的靶基因和靶组织。• agomir的剂量和给yao方式需要根据实验目的和动物模型进行优化，一般建议从低剂量开始逐步增加，观察效果和副作用。• agomir的效果持续时间一般为1周以上，甚至可达5-6周，因此需要合理安排实验时间点和取样方式。• agomir的使用需要配合相应的负对照（negative control），即没有靶基因结合位点的随机序列修饰物，以排除非特异性效应。• agomir的使用需要结合其他方法进行验证，如RT-qPCR、Western blot、免mian疫组化等，以评估微RNA和靶基因表达水平的变化。