大肠检测注意事项
1. 实验需要多组求平均,数据才能够有信服力,此外,空白对照组也是需要的。
2. 实验中要记录好实验时间地点等。
3. 水样取出需要取样器,取样瓶用之前需要灭菌。
其他
1. 水中大肠菌群的检测方法,常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。
2. 若实验所测定的15支管中均为阳性反应,说明浓水样污染严重,可将样品进一步稀释后,再按上述方法接种、培养和观察。
大肠菌群无需稀释检测操作步骤大肠菌群检测操作步骤
1 水样稀释
检测所需水样为100mL。若水样污染严重,可对水样进行稀释。取10 mL水样加入到90 mL无菌水中,必要时可加大稀释度,水样按照10倍逐级稀释。
2 定性反应
用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样,加入培养基粉末,混摇均匀使之完全溶解后,放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3 51孔定量盘法
3.1 用100 mL的无菌稀释瓶量取100 mL水样,加入培养基粉末,混摇均匀使之完全溶解。
3.2 将前述100mL水样全部倒入51孔无菌定量盘内,以手抚平定量盘背面以赶除孔气泡,然后用程控定量封口机封口。放入44.5℃的培养箱内培养24h。
3.3 无需稀释检测范围:1-200MPN/100mL粪大肠菌群(耐热大肠菌群)
4 97孔定量盘法
4.1 将100mL水样全部倒入97孔无菌定量盘内,其余步骤与6.3.1、6.3.2条款相同。
4.2 无需稀释检测范围:1-2419MPN/100mL粪大肠菌群(耐热大肠菌群)
平板计数法(tecount):该方法是统计物品含菌数的有效方法,操作的顺序是首先将样本进行适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼可观察的菌落,然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞,因此平板菌落计数的结果往往偏低。
1、大肠是细菌,属于原核生物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含有核糖体简单的细胞器,没有细胞核,只有拟核;细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
2.大肠的代谢类型是异养兼性厌氧型。
也称粘附素,即大肠的菌毛。致病大肠须先粘附于宿主肠壁,以免被肠蠕动和肠分泌液清除。因此在大肠的中可以适当家一部分表面活性剂增效。也可以通过口服大量有益菌进行抢先占位。3.动物体与大肠的关系:在不致病的情况下(正常状况下),可认为是互利共生;在致病的情况下,可认为是寄生。
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