注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关,t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况,一定排出管子的气泡和空气,防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔,先清楚升主动脉外面的脂肪组织和心外膜组织。
4. 将针头经左心室插入升主动脉(颜色变白的哦),并用钳子固定。
5. 解开右心耳,同时开启灌注泵。注意,不要随便揭开心脏的其他部位,否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功,尤其。
6. 将 4 度的生理盐水(好已动物的发白为标准,我们实验室的大鼠约用 250ml)和多聚甲醛 (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上,以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。
因 SP 是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限,故有学者认为以上的临床与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关,进一步研究发现,在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加,血浆中 CORT 增加,功能抑制等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中 CORT 的水平的增加,这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似,为克服SP 中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点,在 SP 基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。
1.2多平台睡眠剥夺法
M P法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中,在 M P中为扩展大鼠的活动空间将台由 SP 中的 1 个增加至 7 个,仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验,因大鼠可以在 7个台间自由活动,故活动范围较 SP 中有明显增大。经实验比较,在M P中反映应激增强的一些指标,如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在,甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加较SP的更高,提示 M P较SP有更强的应激性!考虑到大鼠为群居动物,单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应,有学者将 M P 法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!
脓毒症动物模型构建方法总结造模方法步骤
一、.盲肠jie扎穿刺法(CLP):
1.实验开始前禁食不禁水12h,小鼠腹腔注射戊巴b妥钠,待小鼠wan全ma醉后仰卧位固定。
2.对腹部喷酒精和碘伏消毒,去除腹部表面毛发,使用手术刀在腹壁切2cm切kou,暴露盲肠,在回盲瓣远端结扎盲肠,然后用针ci穿刺盲肠2次,轻轻挤压盲肠,使少量的肠内容物渗出,将盲肠复位,缝合腹膜和皮肤。
3.小鼠正常饲养6h后皮xia注she30ml/kg生理盐水和30mg/kg的头bao曲松。
药xiao学实验-减肥功能的动物试验评价方法
1 测试项目
1.1 原理
这种方法是用高热量食物诱导动物肥胖,然后给试验样品(肥胖模型),或者同时给高热量食物给试验样品(肥胖预防模型),观察其变化动物体重和体脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF级雄性大鼠,体重180-220g,8-12只/组。在屏障系统下,给大鼠喂养维持饲料并观察5-7天。按体重随机分为两组,10只给予维持饲料作为空白对照组,60只给予高热量模型饲料。每周记录喂食量、洒食量、剩食量,称体重1次。喂养2周后,将给予高热量饲料的60只大鼠按体重增加进行排序,剔除1/3体重增加较低的抗肥胖大鼠。选取40只肥胖敏感大鼠给予高热量饲料6周,空白对照组同时给予维持饲料。
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