首先超低温冰箱不一定可以做到程序控温,就算我们倍玛特生产的一些定制型超低温冰箱,可以有程序降温功能,但是在降温的时候程序的均匀度就完全没有程序冷冻仪那么了,因为低温冰箱主要是压缩机制冷,所以制冷量有限,而倍玛特品牌的程序冷冻仪是用液氮降温,只要液氮足够,制冷量也完全是足够的,关键就是倍玛特的控制软件运行后,怎么做到降温的均匀,这样才是真正的程序控温。
细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪,选择合适的冻存液,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻,该方法的不足为:耗时长,整个降温过程大约需要一天的时间;在降温过程中需要人为多次转移,给样本的降温带来众多不可控因素,从而导致样本的存活率降低;无法有效地消除结晶过程中释放的潜热,增大了样本的率。
细胞冷冻保存,1. 材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法:(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量,亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1~-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
本仪器由以下四部分构成(标准配置):
温控系统:在机箱上配置高精度智能温控器,该温控器通过RS485通讯协议和电脑连接;
电脑软件:在电脑中运行上位机软件,即可设定控温程序,对箱体控温;
冷冻箱: 内外全不锈刚结构.冷冻容机不小于200*200*200毫米.可同时容纳冷冻管160个或血袋8个.
液氮罐及液氮加压器: 液氮加压器安装在30立升的液氮罐上,使罐内自增压,调节阀保持压力稳定.
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