每批试剂需做验证检验：向一份100mL无菌水样中接种含有粪大肠菌的质控样标准菌株，按照上述定量检测步骤操作观察结果，看结果是否在其范围内。
9 注意事项
9.1 如果水样品有背景颜色，需做一个空白试验，与标准检测结果相比较。
9.2 只可使用灭菌水，不含缓冲液的水，不含氧化剂的水进行样品稀释。
9.3 此法所用试剂只用于常规水样，不可用于浓缩水样。
9.4 如水样中含有过多的氯，则加入试剂可能显蓝光，则该水样不可用此方法。
9.5 此法无需在无菌室中进行，但操作过程因避免微生物污染。
9.6 检测使用过的定量盘应灭菌后弃去。把约30个定量盘放入防爆袋中，用绳子松松的扎住袋口，放入高压蒸汽灭菌锅中，121℃高压灭菌20min后取出，在防爆袋上注明“生物垃圾已灭菌”方可弃去。
酶底物法封口机优势特点
酶底物法检测为GB5750-2006、HJ1001-2018收录的用于大肠检测的标准方法，是目前水中大肠检测的方法。凭借方便快捷、假阳性低、适用大量样品快速检测等显著优势，正逐步被国内检测部门所认可。
相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高。检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景。可及时检测、预防，很大限度地降低重大公共安全事故的发生几率。
荧光技术：IFA荧光技术是将已知的抗原或者标记上不影响其活性的荧光素，制成荧光，再用这种荧光或抗原作为探针来检测组织或细胞内的相应抗原或。实际应用上，荧光技术可分为直接法和间接法。直接法是将标记的特异性荧光，直接加在抗原标本上，经过一定的温度和时间的染色，洗去多余荧光，室温下干燥后封片，然后在荧光显微镜下观察结果。